培養基+必需營養物質+適合的溫度+適合的pH模擬體內環境是最常見的細胞體外培養方式，促使細胞在體外的環境中正常生長增值。
事實上細胞在體內真實的生長環境十分復雜，許多細胞在體外平面培養表面會逐步變得更加扁平，分裂異常，并喪失其分化表型。
如何規避常規2D培養帶來的細胞異常風險？
2022年了，該懂點3D細胞培養了！
3D培養是什么？
3D細胞培養是一種在人工創造的環境中生物細胞可以在所有三維空間中生長的技術，使細胞能夠在載體的三維立體空間結構中遷移、生長，構成三維的細胞載體復合物，3D細胞培養允許細胞在體外向各個方向生長，類似于它們在體內的生長方式。
3D培養的優勢
? 在體外模擬復雜的組織結構和體內形態，接近體內正常細胞生長環境
? 展示分化等細胞活動和細胞間反應，實現真實的細胞生物學和功能
? 準確建立靶組織模型，有效預測病程和藥物反應
? 使用少量細胞數，實現快速生長，兼容自動化儀器，降低成本
3D培養助手——NEST細胞小室
細胞小室在3D細胞實驗中是強有力的工具，適用于共培養實驗、趨化實驗、細胞遷移實驗、細胞侵襲以及藥物轉運。
細胞小室作為通透性支持物可以有效改善極性細胞的培養，允許細胞從其基底面和頂面分泌和吸收分子，從而以更為自然的方式進行代謝，大程度的模擬體內環境以培養某些特殊的細胞系。
NEST細胞小室幫助你輕松建立起“生理上的細胞-細胞與細胞-細胞外基質”相互作用，模擬天然組織的特異性！
NEST細胞小室的優勢
? 全規格孔徑：小至0.4μm，大到8μm，能夠滿足大多數較大細胞（如多數腫瘤細胞）穿膜的需求。
? 創新的邊緣設計：便于輕松加樣。
? PC膜：低吸附率，減少小分子蛋白和其他化合物的損失
? PET膜：透明度佳，具有更好的光學清晰度，方便觀察細胞狀態
? 與大部分固定與染色時用的溶劑相容
3D培養Transwell實驗細胞小室使用五大問
Q：使用過程中細胞為什么不轉移？
A：很可能是上室混有高濃度血清或者是小室孔徑不對。
Q：細胞小室培養后的細胞染色時發現細胞分布不均一？
A：可能有以下3種原因：1. 小室是否平衡放置于孔板中2.細胞懸液加入時是否局部過多，在使用過程中細胞懸液要混勻，建議滴加3.小室是否有傾斜或晃動
Q：復孔間為何差距較大？
A：計數不準確或加入多個小室時細胞發生沉降現象，使用中每加一個小室后建議重新混勻。
Q：遷移/侵襲實驗中細胞為何未能遷移至基底室？
A：可能有以下2種原因：1.選擇的膜孔徑偏小。在使用前需選擇合適孔徑的膜。2.小室下面的氣泡會妨礙細胞遷移，導致局部無細胞遷移。可以先放入小室，再先加培養基，避免氣泡產生。
Q：遷移/侵襲實驗中，對照組和測試組之間沒有差別
A：可能有以下2種原因：1.使用的膜孔徑大小不合適，太大或太小都會導致細胞很容易遷過去或者很難遷移。2.小室膜的上層擦拭不充分。一些實驗只需要觀察基底面的細胞，但是兩面的細胞會被染上色并檢測到，所以要擦去上層。
